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深圳pcr考试多久(pcr证书考试时间)

2023-04-15 01:23:57常见问题

pcr证书考试时间

PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称，是一种常用的分子生物学技术。PCR过程中如果没有找到最佳的扩增条件将会导致产生许多不确定的、不需要的产物，有时甚至没有目的产物；而在另一个极端，又可能没有扩增到任何产物。PCR反应条件包括：温度、时间和循环次数。

1、温度与时间的设置

基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40 ～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在Taq DNA 聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100～300bp时)可采用二温度点法，除变性温度外、退火与延伸温度可合二为一，一般采用94℃变性，65℃左右退火与延伸(此温度Taq DNA酶仍有较高的催化活性)。

①变性温度与时间：变性温度低，解链不完全是导致PCR失败的最主要原因。一般情况下，93℃～94℃lmin足以使模板DNA变性，若低于93℃则需延长时间，但温度不能过高，因为高温环境对酶的活性有影响。此步若不能使靶基因模板或PCR产物完全变性，就会导致PCR失败。

②退火(复性)温度与时间：退火温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至40℃～60℃，可使引物和模板发生结合。由于模板DNA 比引物复杂得多，引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞。退火温度与时间，取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度。对于20个核苷酸，G+C含量约50%的引物，55℃为选择最适退火温度的起点较为理想。引物的复性温度可通过以下公式帮助选择合适的温度：

Tm值(解链温度)=4(G+C)＋2(A+T)

复性温度=Tm值-(5～10℃)

在Tm值允许范围内，选择较高的复性温度可大大减少引物和模板间的非特异性结合，提高PCR反应的特异性。复性时间一般为30～60sec，足以使引物与模板之间完全结合。

③延伸温度与时间：Taq DNA聚合酶的生物学活性：

70～80℃ 150核苷酸/S/酶分子

70℃ 60核苷酸/S/酶分子

55℃ 24核苷酸/S/酶分子

高于90℃时， DNA合成几乎不能进行。

PCR反应的延伸温度一般选择在70～75℃之间，常用温度为72℃，过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。PCR延伸反应的时间，可根据待扩增片段的长度而定，一般1Kb以内的DNA片段，延伸时间1min是足够的。3～4kb的靶序列需3～4min；扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增，延伸时间要稍长些。

2、循环次数

循环次数决定PCR扩增程度。PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30～40次之间，循环次数越多，非特异性产物的量亦随之增多。

pcr上岗证考试时间

pcr证每年三月份和九月份考

pcr证书考试时间北京

1)年龄在18周岁以上；

2)遵守法律法规、恪守职业道德且品行良好；

3)身体健康状况能够正常履行职责；

4)掌握生物学相关知识。

pcr证书考试内容

分地区。

只能通过所在单位组织报名,但是有些省份考试不限地区,所以不是同一个省也可以报名(如果审核不严,可以尝试报名),如果是有地区限制的,外省的就参加不了考试pcr证书在各省临床检验中心报名考试。

pcr证书报考条件

pcr证书在各省临床检验中心报名考试，报考条件是：

1、年满18周岁；

2、遵守法律、法规，恪守职业道德；

3、具有良好的品行；

4、具有正常履行职责的身体条件；

5、具有生物学相关知识。

pcr证每年什么时候考2021

报名条件有：1、实验室通过卫生部或者所在省、市有关部门组织的验收合格；

2、操作人员要参加专门培训并且考试合格。

pcr是利用dna双链复制的原理，在生物体外大量扩增特定dna片段的分子生物学技术，其特点是可以以微量的dna为模板，快速扩增得到大量拷贝。上岗证指从事某种行业或岗位所具有的资格证明，其根据单位的不同要求是不一样的，一般企业自主培训的人员的上岗证只能在单位内部使用，还有一种是国家的颁发的专业技术特有的上岗证，是在全国都可以使用的。